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產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規格 |
RNAsolid 組織RNA穩定保存液 |
100 mL |
M0k942142 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
RNAsolid組織RNA穩定保存液常用于采集動(dòng)物組織時(shí),僅需室溫操作,即可迅速抑制RNase并穩定保存組織樣品中的RNA。本產(chǎn)品使用范圍廣,不僅可廣泛用于新鮮動(dòng)物組織樣品如肝臟、腦、肺、脾臟、腎臟、心臟、肌肉等,同時(shí)也可用于RNA病毒、培養細胞、真菌、細菌、血液以及某些植物樣品的保存,更加適合樣品收集后不能夠立即進(jìn)行RNA抽提(包括miRNA等小RNA)的情況,特別適用于野外或臨床采集的樣品、大批量采集的動(dòng)物組織樣品和不能立即凍存樣品的RNA穩定與保存。本產(chǎn)品的效果和液氮凍存的效果相當。本產(chǎn)品可以迅速滲透到組織內部,完全抑制內源性RNase,避免RNA降解,保持樣本中RNA的完整性,并且和液氮一樣可長(cháng)期保存樣品中的RNA。本產(chǎn)品安全便捷,無(wú)任何毒性和刺激性,可室溫使用,確保了使用時(shí)的安全和便捷,與使用液氮相比,可有效避免因使用超低溫的液氮而引起的凍傷、離心管爆裂等安全隱患,并且攜帶、運輸非常方便。在本產(chǎn)品中樣品的保存時(shí)間和存儲溫度相關(guān),例如37℃可保存1~2天,室溫25℃可保存一周,4℃可以保存1個(gè)月,-20℃或更低溫度可以長(cháng)期保存。
儲存與運輸
室溫運輸;室溫保存,24個(gè)月有效。
組成
Component |
G3019-100ML |
G3019-1.2ML |
RNAsolid 組織RNA穩定保存液 |
100 mL |
70×1.2 mL |
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) |
1份 |
操作流程
1. 樣品處理
a) 動(dòng)物組織:將組織剪切成合適大小后(建議組織塊長(cháng)寬高均不大于0.5 cm),然后迅速完全浸泡于5~10倍體積的RNAsolid組織RNA穩定保存液中。(注意:已浸入RNAsolid試劑中的組織經(jīng)平衡一段時(shí)間后,可從溶液中取出,切成更小的組織塊,再重新放回RNAsolid試劑中;有些比較弱的液體滲透性組織如骨頭等,不適合用本品進(jìn)行RNA保護。)
b) 植物組織:本品對于柔軟的植物組織(如嫩葉,嫩莖)可直接滲透,且達到理想的RNA保護效果。將組織切成合適的大?。ńㄗh長(cháng)寬高均不大于0.5 cm)后,然后迅速完全浸泡于5~10倍體積的RNAsolid組織RNA穩定保存液中。(注意:某些植物組織天生具有的屏障,如葉子表面的蠟層可阻礙RNAsolid試劑的滲透,對于此類(lèi)組織,通常需破壞這些屏障層以允許溶液的浸透。)
c) 細胞等樣本:收集細胞沉淀(用PBS清洗1-2次)。之后迅速加入5~10倍體積的RNAsolid組織RNA穩定保存液。
d) 酵母、細菌等樣本:離心棄上清,收集一定量的菌體沉淀,然后迅速加入適量的RNAsolid組織RNA穩定保存液完全浸沒(méi)菌體沉淀。
e) 全血樣本:收集100-300 μL新鮮的血液樣品,加入含抗凝劑(EDTA鈉鹽、鉀鹽、肝素或檸檬酸鹽等)的抗凝管中,顛倒混勻。按1:5的比例加入本試劑,例如200 μL血液加入1000 μL RNAsolid組織RNA穩定保存液,顛倒混勻;對于血清或血漿也可按照1:5比例加入RNAsolid組織RNA穩定保存液保存。
f) RNA病毒等:對于拭子樣品采集后,將拭子直接加入含有0.5-1 mL RNAsolid組織RNA穩定保存液中進(jìn)行保存;對于液體等樣品采集后加入5-10倍體積的RNAsolid組織RNA穩定保存液,然后置于相應溫度條件下保存。
2. 樣品保存
加入有RNAsolid組織RNA穩定保存液的樣本可在37℃保存1~2天,2天以后部分組織中的RNA會(huì )開(kāi)始降解。室溫(25℃)穩定保存1周,不會(huì )有明顯的RNA降解發(fā)生。大部分樣品置于RNAsolid組織RNA穩定保存液中,4℃條件下可穩定保存1個(gè)月,不會(huì )有明顯的RNA降解發(fā)生。如果需要將樣品長(cháng)期保存,先使保存在RNAsolid組織RNA穩定保存液中的樣本于4℃浸透過(guò)夜,然后將RNAsolid保護液吸出棄去,再放入-20℃或-80℃,可長(cháng)期穩定保存3~5年。
3. RNA提取
a) 組織樣本:用潔凈鑷子從RNAsolid組織RNA穩定保存液中取出組織塊,然后用干凈的吸水紙吸掉表面液體。之后立即置于合適的裂解液中勻漿或液氮中進(jìn)行研磨操作,后續即可采用Trizol或離心柱法等進(jìn)行RNA提取操作。
b) 細胞、細菌類(lèi)樣本:對于細胞、細菌類(lèi)樣本盡量保持離心后的沉淀處于緊實(shí)狀態(tài),避免重懸,否則可能會(huì )對后續RNA得率有一定影響。在保存的樣本中加入與RNAsolid組織RNA穩定保存液等體積的PBS或DEPC水,5000~10,000g離心1~5分鐘收集沉淀樣品,小心吸除上清液,后續即可采用Trizol或離心柱法進(jìn)行RNA提取操作。
c) 全血、病毒類(lèi)液體樣本:參考后續使用RNA提取產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。
注意事項
1. 實(shí)驗中獲得的組織樣品適當處理大小后,應迅速并完全浸泡在RNAsolid組織RNA穩定保存液中。
2. 使用本產(chǎn)品在-20℃或-80℃凍存的樣品,反復凍融3-5次不會(huì )顯著(zhù)影響RNA的質(zhì)量。通常情況下,推薦把本產(chǎn)品保存的樣品在室溫或4℃運輸或短期存放,-20℃或-80℃長(cháng)期存放。如-20℃或-80℃長(cháng)期存放,須先4℃存放過(guò)夜或更長(cháng)時(shí)間后,才能轉移到更低溫度存放。
3. 本產(chǎn)品適用于新鮮動(dòng)物組織樣品或細胞中RNA的穩定與保存。樣品凍存后再用RNAsolid保存的效果會(huì )比直接將新鮮樣品用RNAsolid保存差很多。本產(chǎn)品盡管對于凍存的樣品也有一定的穩定保存作用,但更適合新鮮樣品。
4. 本產(chǎn)品保存的組織樣品能用常規的RNA抽提方法進(jìn)行RNA抽提,如Trizol法和離心柱法等,使用時(shí)直接將樣品從RNAsolid試劑中取出當作常規的新鮮或凍存樣品即可,少量殘留的RNAsolid試劑不會(huì )影響后續提取效果。
5. 本產(chǎn)品也可用于組織中蛋白和DNA的穩定和保存,但RNAsolid會(huì )導致蛋白質(zhì)變性,后續可進(jìn)行Western Blot、SDS-PAGE等實(shí)驗,而不適用于蛋白或酶功能活性測試等實(shí)驗。樣品從RNAsolid試劑中取出后可直接參考新鮮或凍存樣品并按照常規方法進(jìn)行蛋白提取。
6. 用本產(chǎn)品保存后,樣品可能會(huì )變得微硬,為正?,F象,不會(huì )影響后續RNA抽提時(shí)組織的勻漿、裂解等操作。
7. -20℃或-80℃保存情況下,樣品解凍時(shí)RNAsolid試劑中可能有結晶析出,屬正?,F象,可待結晶完全溶解后使用,不會(huì )影響后續RNA的抽提效果。
8. 血液白細胞樣品按照常規方法分離后,可以參考細胞樣品的方法進(jìn)行保存。
9. 用于植物樣品保存時(shí),應當去除表面蠟質(zhì),確保RNAsolid試劑能充分滲透進(jìn)入組織內部。
10. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!
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