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G-418

價(jià)格: 在線(xiàn)咨詢(xún)
貨號:
FKU0147
產(chǎn)品規格:
1g
購買(mǎi)數量:
產(chǎn)品詳情 操作說(shuō)明 注意事項

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

G-418(Geneticin,遺傳霉素),也稱(chēng)為G418,是一種氨基糖苷類(lèi)抗生素,其結構與新霉素、慶大霉素、卡那霉素相似。G-418能通過(guò)抑制轉座子Tn601,Tn5的基因表達,干擾核糖體功能而阻斷蛋白質(zhì)合成,對原核和真核等細胞都有毒性。

在分子遺傳實(shí)驗中,G-418是穩定轉染最常用的抗性篩選試劑。當neo基因被整合進(jìn)真核細胞DNA后,能啟動(dòng)neo基因編碼的序列轉錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉移酶的高效表達,使細胞獲得抗性而能在含有G-418的選擇性培養基中生長(cháng)。G-418的這一選擇特性,已在基因轉移、基因敲除、抗性篩選以及轉基因動(dòng)物等方面得以廣泛應用。


主要參數

分子式:C20H40N4O10·2H2SO4

分子量:692.7

性狀:白色或灰色粉末

溶解性:易溶于水


儲存與運輸

冰袋(wet ice)運輸,-20℃保存,有效期24個(gè)月。


使用說(shuō)明

可用PBS緩沖液溶解本產(chǎn)品,配制50 mg/mL或其他濃度的儲存液,過(guò)濾除菌后分裝成小份置于-20℃保存。臨用前融化均勻后稀釋至所需濃度。溶液避免反復凍融。

篩選哺乳動(dòng)物細胞,推薦起始篩選濃度為400 μg/mL。篩選植物細胞,推薦起始篩選濃度為10 μg/mL。篩選酵母,推薦起始濃度為500 μg/mL。建議根據具體篩選材料及起始濃度作用效果進(jìn)行調整,確定最佳篩選濃度。

以篩選哺乳動(dòng)物細胞為例,將細胞制成懸液稀釋至1000個(gè)細胞/mL,取100μL細胞懸液加入含培養基的24孔板中,將每孔中G-418終濃度調整至0,100,200,300,400,500,600,700,800,900,1000μg/mL等梯度,每3-5天更換含G-418的篩選液,培養10-14天,以使全部細胞死亡的最低G-418濃度進(jìn)行下一步篩選。此步驟僅供參考,可根據實(shí)驗試劑情況調整。


注意事項

為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。


本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!

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