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產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱(chēng) |
產(chǎn)品編號 |
規格 |
DNase I (RNase Free) |
M0k942138 |
200U |
產(chǎn)品描述
DNase I(Deoxyribonuclease I,脫氧核糖核酸酶 I)是一種核酸內切酶,可以將單鏈、雙鏈DNA降解為5'-磷酸、3'-羥基末端的單脫氧核苷酸或者寡核苷酸;DNase I的活性依賴(lài)鈣離子,能夠被鎂離子和二價(jià)錳離子激活;鎂離子存在條件下,DNase I可隨機剪切雙鏈DNA的任意位點(diǎn);二價(jià)錳離子存在條件下,DNase I可在同一位點(diǎn)剪切DNA雙鏈,形成平末端,或1-2個(gè)核苷酸突出的粘末端。
主要用途:制備不含DNA的RNA樣品;
RT-PCR反應前RNA樣品中基因組DNA殘留去除;
體外T7,T3,SP6等RNA Polymerases催化的RNA轉錄后體系中DNA模板去除;
缺口平移(nick translationin)DNA標記;
產(chǎn)生DNA隨機片段文庫;
細胞凋亡Tunel檢測中部分剪切基因組DNA作為實(shí)驗陽(yáng)性對照等。
特點(diǎn):特異性降解DNA,不降解RNA。
酶活性定義:在37℃孵育10 min將1 μg pBR322載體DNA全部降解所需酶量定義為一個(gè)酶活單位。
失活或抑制:加入EDTA后,65℃加熱10 min可使DNase I充分失活,酚LF抽提也可使DNase I失活。
純度:SDS-PAGE檢測純度≥95%,無(wú)RNase,1 U/μL。
酶儲存緩沖液:10 mM Tris-HCl,2 mM CaCl2,50% Glycerol,pH 7.6。
10×DNase I Reaction Buffer:100 mM Tris-HCl,25 mM MgCl2,5 mM CaCl2,pH 7.6。
儲存與運輸
冰袋(wet ice)運輸;-20℃保存,有效期12個(gè)月。
組成
Component Number |
Component |
G3342-200U |
G3342-1 |
DNase I (RNase free) |
200 U |
G3342-2 |
10×DNase I Reaction Buffer |
1 mL |
G3342-3 |
25 mM EDTA |
250 μL |
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) |
1份 |
參考使用
1. 參考反應體系:
RNA樣品 |
1 μg |
DNase I |
1 U |
10×DNase I Reaction Buffer |
1 μL |
RNase free Water |
To 10 μL |
2. 配制反應完成后,輕輕混勻,隨后將液體離心至管底;
3. 37℃孵育30 min,反應完后在反應體系中加入1 μL 25 mM EDTA終止反應;
4. 65℃孵育10 min使DNase I完全失活。
注意事項
1. 使用該產(chǎn)品時(shí)應將酶置于冰盒或冰浴中,使用完畢后立即于-20℃保存。
2. DNase I反應體系可參考實(shí)驗需求以及實(shí)際應用產(chǎn)品相應使用說(shuō)明調整。
3. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!
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