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產(chǎn)品詳情
操作說(shuō)明
注意事項
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
本公司生產(chǎn)的BCA蛋白濃度測定試劑盒是根據目前廣泛應用的蛋白濃度檢測方法之一BCA法研制而成。其操作簡(jiǎn)單，靈敏度高，所形成的顏色復合物穩定性佳，受干擾物質(zhì)影響小?？蓹z測濃度下限達25 μg/mL的蛋白樣品，最小檢測蛋白量達到0.5 μg，待測樣品體積為1-20 μL。 本產(chǎn)品主要成分為：BCA二鈉鹽，無(wú)水碳酸鈉，酒石酸鉀，氫氧化鈉，碳酸氫鈉和硫酸銅。
包裝內容：
| 產(chǎn)品貨號 | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 |
| G2026-1 | BCA試劑 | 40 mL/100 mL×2 |
| G2026-2 | 硫酸銅溶液 | 1.2 mL/1.2 mL×5 |
| G2026-3 | 蛋白標準品（BSA）（4℃） | 25 mg/25 mg×5 |
| G2026-4 | 蛋白標準配制液 | 1.5 mL/1.5 mL×5 |
保存條件：
蛋白標準品4℃保存，溶解后應放-20℃保存。其余試劑常溫保存。有效期12個(gè)月。
使用方法：
1.取1 mL蛋白標準配置液加入到25 mgBSA的蛋白標準管中，完全溶解蛋白標準品，即為25 mg/mL的蛋白標準溶液。配制成的蛋白標準溶液可-20℃長(cháng)期保存。
2.取適量25 mg/mL蛋白標準溶液，稀釋至終濃度為0.5 mg/mL。標準品最好與蛋白樣品用同樣的溶液稀釋。但為了簡(jiǎn)便起見(jiàn)，通常使用0.9% NaCl或PBS稀釋標準品。
3.做標準曲線(xiàn)。將標準品按0，1，2，4，8，12，16，20μL加到96孔板中，不足20 μL的加標準品稀釋液補足到20 μL。
4.將待測的蛋白樣品稀釋至合適濃度，加到96孔板中，使待測樣品總體積也為20 μL。
5.根據樣品數量，按50體積BCA試劑加1體積硫酸銅溶液(50：1)配制適量BCA工作液，充分混勻。BCA工作液室溫24小時(shí)內穩定。
6.每孔加入BCA工作液200 μL，充分混勻(可將酶標板放在振蕩器上振蕩30s)，37℃放置30 min后，以標準曲線(xiàn)0號做參比，在562nm波長(cháng)下比色測定，記錄各孔吸光度值。(注：也可以在室溫放置2 h，或60℃放置30 min。如果蛋白濃度較低，最好放在60℃條件下反應。)
7.以標準品蛋白含量(μg)為橫坐標，吸光值為縱坐標，繪出標準曲線(xiàn)。根據所測樣品的吸光值，在標準曲線(xiàn)上即可查得相應的蛋白含量(μg)，除以樣品稀釋液總體積(20 μL)，乘以樣品稀釋倍數即為樣品實(shí)際濃度。
注意事項：
1.BCA法測定蛋白濃度受溫度和時(shí)間的影響較大，吸光度值會(huì )隨著(zhù)時(shí)間的延長(cháng)不斷升高，且顯色反應會(huì )因溫度的升高而加快。如果不能精確控制顯色反應的時(shí)間和溫度，建議每次測定都需要做標準曲線(xiàn)。
2.本試劑也適用與分光光度計測定，但需要根據測定的最小體積調整樣品和BCA工作液的用量。
3.為保證蛋白的精確定量，樣品的提取和標準蛋白的配制最好選用相同的緩沖液，同時(shí)也要保證兩者檢測條件的一致性。如果緩沖液本身就有較高的背景值，建議使用其他的方法測定。
4.BCA法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響，可以兼容樣品中高達5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20，Tween 60，Tween 80。但在樣品含有脂類(lèi)物質(zhì)時(shí)將明顯提高吸光度值。且受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響，需確保EDTA低于10mM，無(wú)EGTA，二硫蘇糖醇或β-巰基乙醇低于1mM。不適用BCA法時(shí)建議使用其他方法測定。
凡合肥萬(wàn)物生物科技有限公司銷(xiāo)售的產(chǎn)品均有嚴格的質(zhì)量保證。如發(fā)現產(chǎn)品存在包裝規格疑問(wèn)，請于收貨之日起七日內向我公司總部或當地辦事處提出，并請保證該產(chǎn)品，以備本公司進(jìn)行核對檢驗。如果發(fā)現有質(zhì)量問(wèn)題，請于收貨后一月內保留產(chǎn)品50%以上的量，以便本公司回收產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)檢，確認產(chǎn)品質(zhì)量。如逾期，則視為已經(jīng)對本公司產(chǎn)品進(jìn)行驗收。 聲明：如發(fā)生產(chǎn)品索賠事宜，本公司僅在產(chǎn)品價(jià)格范圍內酌情賠償，恕不接受超出產(chǎn)品價(jià)格范圍之賠償?？蛻?hù)在使用過(guò)程中有任何技術(shù)問(wèn)題可以撥打技術(shù)售后服務(wù)電話(huà)我們隨時(shí)給予解答。
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