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紅細胞裂解液

價(jià)格: 在線(xiàn)咨詢(xún)
貨號:
FKU0148
產(chǎn)品規格:
500ml
購買(mǎi)數量:
產(chǎn)品詳情 操作說(shuō)明 注意事項

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

本產(chǎn)品紅細胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer,或稱(chēng)ACK Lysis Buffer),是一種經(jīng)典的用于去除紅細胞的裂解液,在不損傷有核細胞的前提下充分去除紅細胞。經(jīng)紅細胞裂解液裂解得到的組織細胞中不含紅細胞,可進(jìn)一步用于原代培養、細胞融合、流式細胞分析、核酸與蛋白的分離及提取等。其基本原理是利用細胞內滲透壓濃度差而導致細胞膜脹破的原理裂解紅細胞。主要成分包含氯化銨、碳酸氫鉀、EDTA-Na2。因銨根離子無(wú)法通過(guò)細胞膜,而其他離子可以通過(guò),造成細胞內外的離子濃度差異,外部水分擴散至細胞內,使紅細胞膨脹,達到裂解效果。本產(chǎn)品經(jīng)0.2 μm濾膜過(guò)濾除菌。


儲存與運輸

冰袋(wet ice)運輸;4℃保存,有效期12個(gè)月。


使用方法

組織細胞樣品:

1. 新鮮組織經(jīng)胰酶或膠原酶等消化分散成單個(gè)細胞懸液,離心棄去上清液;

2. 按1:3-5比例向細胞沉淀中加入紅細胞裂解液,輕輕吹打混勻,裂解1-2 min;

3. 800-1000 rpm離心5-8 min,離心棄去上層紅色清液;

4. 收集沉淀部分,加入Hank’s液或無(wú)血清培養液離心洗2-3次;

5. 如裂解不完全可重復步驟2和3;

6. 根據實(shí)驗需要用適當溶液重懸細胞,用于后續實(shí)驗;如提取RNA,最好是于步驟4開(kāi)始使用DEPC水配制的溶液。

血細胞:

1. 新鮮抗凝血,離心棄去上清液;

2. 按1:6-10比例向細胞沉淀中加入紅細胞裂解液,輕輕吹打混勻,裂解1-5 min;

3. 800-1000 rpm離心5-8 min,離心棄去上層紅色清液;

4. 收集沉淀部分,加入Hank’s液或無(wú)血清培養液離心洗2-3次;

5. 如裂解不完全可重復步驟2和3;

6. 根據實(shí)驗需要用適當溶液重懸細胞,用于后續實(shí)驗;如提取RNA,最好是于步驟4開(kāi)始使用DEPC水配制的溶液進(jìn)行。


注意事項

1. 本品經(jīng)過(guò)濾除菌,使用時(shí)請注意無(wú)菌操作,避免細菌污染。

2. 后續試驗如是用于細胞培養,操作過(guò)程中應注意在超凈工作臺中完成,并注意無(wú)菌操作,以免細胞被污染,影響細胞培養。

3. 在離心洗滌后,如發(fā)現極微量的紅細胞,可繼續試驗,不會(huì )影響后續檢測。

4. 操作時(shí)請穿實(shí)驗服,佩戴一次性手套。

本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!

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