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產(chǎn)品簡介
Cell Counting Kit-8,簡稱CCK-8(或CCK8)試劑盒,是一種廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的快速、高靈敏度檢測試劑盒。其檢測原理在于,在電子耦合試劑存在的情況下,檢測試劑中的WST-8化合物被活細胞內(nèi)脫氫酶還原成具有水溶性的橙黃色甲臜化合物,該物質(zhì)在450 nm處有最大吸收峰。甲臜量與活細胞數(shù)成正比,即細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數(shù)目呈線性關(guān)系。本試劑盒中WST-8對細胞無明顯毒性,可以用于外源細胞因子等誘導的細胞增殖檢測,以及藥物等對細胞有毒試劑誘導的細胞毒性檢測,或一些藥物誘導的細胞生長抑制檢測,是MTT檢測方法的升級版。
本試劑盒使用便捷,無需配制或稀釋,無需收集或洗滌細胞,無需對甲臜化合物進行再次溶解,對貼壁細胞及懸浮細胞均適用。且酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。
儲存與運輸
冰袋(wet ice)避光運輸;避光保存,4℃保存12個月有效;也可-20℃保存,24個月有效。
操作步驟
1. 細胞處理:細胞以合適密度種板,如是貼壁細胞需待貼壁良好。根據(jù)實驗需要進行加藥、轉(zhuǎn)染等處理;
2. 顯色:按照每100 μL細胞培養(yǎng)液加入10 μL CCK-8溶液比例加入試劑,在細胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育2 h;
3. 檢測:在酶標儀中于450 nm波長處測定吸光度。
注意事項
1. 本試劑盒檢測原理是依賴于脫氫酶催化的反應(yīng),樣品中如有較多還原劑(例如一些抗氧化劑)會干擾檢測,需設(shè)法去除。
2. 加檢測試劑時避免產(chǎn)生氣泡,否則會干擾檢測結(jié)果。
3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!
合肥萬物生物科技有限公司
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