10% SDS-PAGE高分辨彩色(紅色)凝膠超快速配制試劑盒

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貨號：

S0921K69

產(chǎn)品規(guī)格：

50T

品牌：

萬物

購買數(shù)量：

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產(chǎn)品詳情操作說明注意事項

產(chǎn)品描述

本試劑盒提供了簡單而又快速的8% SDS-PAGE高分辨彩色(紅色)凝膠配制試劑，能夠同時制備下層膠(即分離膠)和上層膠(也稱濃縮膠、積成膠)，用戶只需準備制膠設備，即可快速制備蛋白凝膠。試劑盒中上層膠溶液中含有紅色染料，使得蛋白點樣孔清晰呈現(xiàn)，實現(xiàn)了加樣過程的可視化，極大的提高了加樣效率。凝膠可200 V恒壓電泳，僅需30 min即可完成電泳過程，相較于傳統(tǒng)的凝膠電泳體系耗時更短，且分辨率更高。

本方法配制時無需自行添加TEMED，僅需AP（過硫酸銨）即可形成凝膠，大大減少了TEMED對人體和環(huán)境的危害。本產(chǎn)品為改良型Bis-Tris配方凝膠，25×電泳緩沖液為MOPS電泳緩沖液，不能使用Tris-Glycine電泳緩沖液。具體配制的凝膠塊數(shù)量與凝膠的厚薄以及凝膠的大小有關。

儲存與運輸

冰袋（wet ice）運輸；

4℃避光保存，其中BTT電泳緩沖液（25×）可室溫保存，12個月有效。

操作步驟

1. 根據(jù)目的蛋白分子量大小選擇合適濃度的SDS-PAGE下層膠（分離膠），參照表格如下

丙烯酰胺濃度	最佳分離范圍
8%	≥35 kDa
10%	10-250 kDa
12%	10-100 kDa

2. 配制10% AP溶液：稱取AP（過硫酸銨）粉末0.1 g，用1 mL水完全溶解。該溶液4℃存貯1-2周有效，-20℃保存3個月有效；

3. 跟據(jù)實驗需求，等比例混合對應的溶液A和B，加入適量的10% AP溶液，分別配制下層膠溶液、上層膠溶液。不同規(guī)格以及不同厚度的玻璃板可以等比例調整上層膠和下層膠溶液的配制體積，以常用規(guī)格8.3 cm×7.3 cm凝膠板為例，推薦配制體系如下表格：

配制組別	組分	單塊凝膠(1.0 mm厚度)	兩塊凝膠(1.0 mm厚度)
下層膠溶液	8% BTT下層膠溶液A	2.5 mL	5 mL
	8% BTT下層膠溶液B	2.5 mL	5 mL
	10% AP	100 μL	200 μL
上層膠溶液	BTT上層膠溶液A	1 mL	2 mL
	BTT上層膠溶液B(紅色)	1 mL	2 mL
	10% AP	40 μL	80 μL

4. 裝配好凝膠制具，先加入配制好的下層膠溶液，并立即緩慢均勻的加入配制好的上層膠溶液（也可使用蒸餾水封住下層膠液面，待下層膠凝固充分后再加入配制好的上層膠溶液，約15-30 min），插入梳子，待其凝固（約15-30 min左右）后即可使用；

5. 配制完成的凝膠如不能當天使用，可4℃保存1-2天后使用；

6. 電泳前將BTT電泳緩沖液（25×）稀釋成1×電泳緩沖液即可（電泳緩沖液不建議重復使用超過2次）；

7. 電泳時可全程200 V恒壓電泳，一般30分鐘左右即可完成電泳。

注意事項

1. 預混液中存在單體丙烯酰胺，對人體有害，操作時請注意做好防護措施。

2. 為了保證樣本同時進入分離膠，直接灌制上層膠時需緩慢均勻的加入配制好的上層膠溶液。

3. 加入AP之后盡快灌制凝膠，請勿長時間放置。

4. 如需進一步加快凝膠速度，可增加0.5倍10% AP使用量。

5. 膠的凝固與溫度有顯著的正相關性。同等條件下，溫度越高，凝固速度越快。

6. 本公司同時提供其他彩色（綠色、黃色、藍色）上層膠溶液，以區(qū)別不同樣本不同凝膠電泳。

7. 本試劑盒制成的凝膠不能兼容Tris-Glycine電泳緩沖體系，只能與套裝內BTT電泳緩沖液配套使用，另提供BTT電泳緩沖液（25×）單品。

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