12% SDS-PAGE高分辨彩色(紅色)凝膠超快速配制試劑盒

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貨號：

S0921K70

產(chǎn)品規(guī)格：

50T

品牌：

萬物

購買數(shù)量：

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產(chǎn)品詳情操作說明注意事項

產(chǎn)品描述

本試劑盒提供了簡單而又快速的12% SDS-PAGE高分辨彩色(紅色)凝膠配制試劑，能夠同時制備下層膠(即分離膠)和上層膠(也稱濃縮膠、積成膠)，用戶只需準(zhǔn)備制膠設(shè)備，即可快速制備蛋白凝膠。試劑盒中上層膠溶液中含有紅色染料，使得蛋白點樣孔清晰呈現(xiàn)，實現(xiàn)了加樣過程的可視化，極大的提高了加樣效率。凝膠可200 V恒壓電泳，僅需30 min即可完成電泳過程，相較于傳統(tǒng)的凝膠電泳體系耗時更短，且分辨率更高。

本方法配制時無需自行添加TEMED，僅需AP（過硫酸銨）即可形成凝膠，大大減少了TEMED對人體和環(huán)境的危害。本產(chǎn)品為改良型Bis-Tris配方凝膠，25×電泳緩沖液為MOPS電泳緩沖液，不能使用Tris-Glycine電泳緩沖液。具體配制的凝膠塊數(shù)量與凝膠的厚薄以及凝膠的大小有關(guān)。

儲存與運輸

冰袋（wet ice）運輸；

4℃避光保存，其中BTT電泳緩沖液（25×）可室溫保存，12個月有效。

操作步驟

1. 根據(jù)目的蛋白分子量大小選擇合適濃度的SDS-PAGE下層膠（分離膠），參照表格如下

丙烯酰胺濃度	最佳分離范圍
8%	≥35 kDa
10%	10-250 kDa
12%	10-100 kDa

2. 配制10% AP溶液：稱取AP（過硫酸銨）粉末0.1 g，用1 mL水完全溶解。該溶液4℃存貯1-2周有效，-20℃保存3個月有效；

3. 跟據(jù)實驗需求，等比例混合對應(yīng)的溶液A和B，加入適量的10% AP溶液，分別配制下層膠溶液、上層膠溶液。不同規(guī)格以及不同厚度的玻璃板可以等比例調(diào)整上層膠和下層膠溶液的配制體積，以常用規(guī)格8.3 cm×7.3 cm凝膠板為例，推薦配制體系如下表格：

配制組別	組分	單塊凝膠(1.0 mm厚度)	兩塊凝膠(1.0 mm厚度)
下層膠溶液	8% BTT下層膠溶液A	2.5 mL	5 mL
	8% BTT下層膠溶液B	2.5 mL	5 mL
	10% AP	100 μL	200 μL
上層膠溶液	BTT上層膠溶液A	1 mL	2 mL
	BTT上層膠溶液B(紅色)	1 mL	2 mL
	10% AP	40 μL	80 μL

4. 裝配好凝膠制具，先加入配制好的下層膠溶液，并立即緩慢均勻的加入配制好的上層膠溶液（也可使用蒸餾水封住下層膠液面，待下層膠凝固充分后再加入配制好的上層膠溶液，約15-30 min），插入梳子，待其凝固（約15-30 min左右）后即可使用；

5. 配制完成的凝膠如不能當(dāng)天使用，可4℃保存1-2天后使用；

6. 電泳前將BTT電泳緩沖液（25×）稀釋成1×電泳緩沖液即可（電泳緩沖液不建議重復(fù)使用超過2次）；

7. 電泳時可全程200 V恒壓電泳，一般30分鐘左右即可完成電泳。

注意事項

1. 預(yù)混液中存在單體丙烯酰胺，對人體有害，操作時請注意做好防護措施。

2. 為了保證樣本同時進入分離膠，直接灌制上層膠時需緩慢均勻的加入配制好的上層膠溶液。

3. 加入AP之后盡快灌制凝膠，請勿長時間放置。

4. 如需進一步加快凝膠速度，可增加0.5倍10% AP使用量。

5. 膠的凝固與溫度有顯著的正相關(guān)性。同等條件下，溫度越高，凝固速度越快。

6. 本公司同時提供其他彩色（綠色、黃色、藍色）上層膠溶液，以區(qū)別不同樣本不同凝膠電泳。

7. 本試劑盒制成的凝膠不能兼容Tris-Glycine電泳緩沖體系，只能與套裝內(nèi)BTT電泳緩沖液配套使用，另提供BTT電泳緩沖液（25×）單品。

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