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產(chǎn)品簡介
革蘭氏染色法是微生物學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,可用來區(qū)分革蘭氏陽性菌(G+)和革蘭氏陰性菌(G-),基本原理是基于細菌細胞壁化學(xué)組分不同。細菌經(jīng)結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細胞壁內(nèi)形成不溶于水的結(jié)晶紫-碘復(fù)合物。革蘭氏陽性細菌由于細胞壁較厚,不含類脂,富含肽聚糖并交聯(lián)形成致密網(wǎng)格結(jié)構(gòu),在用乙醇處理時肽聚糖網(wǎng)孔收縮,能將結(jié)晶紫-碘復(fù)合物阻留在細胞壁內(nèi),使其呈現(xiàn)結(jié)晶紫的紫色。而革蘭氏陰性細菌因其細胞壁薄,肽聚糖含量低且交聯(lián)松散。遇乙醇時富含類脂的外膜溶解,在細胞壁上出現(xiàn)較大縫隙,結(jié)晶紫-碘復(fù)合物流出,因此經(jīng)乙醇脫色后細胞又成無色。此時再經(jīng)番紅復(fù)染,革蘭氏陰性細菌將被染成紅色。
本產(chǎn)品革蘭氏染色液,包含四個組分,分別是草酸銨結(jié)晶紫染色液,1%碘溶液,脫色液和復(fù)紅染色液。經(jīng)染色后,革蘭氏陽性菌呈紫色至藍紫色,革蘭氏陰性菌呈紅色。
儲存與運輸
常溫保存與運輸;有效期12個月。
使用方法
1. 石蠟切片脫蠟至水;細菌涂片自然干燥或酒精燈略加溫干燥固定。
2. 初染:滴加結(jié)晶紫染色液覆蓋樣本染色10-30 s,水洗,甩干水分。
3. 媒染:滴加1%碘溶液覆蓋樣本染色1-1.5 min,水洗,甩干水分。
4. 脫色:滴加脫色液從載玻片一端沖洗組織進行脫色,直至流下的脫色液不再出現(xiàn)紫色為止,立即水洗去除脫色液。注意控制脫色時間。
5. 復(fù)染:滴加復(fù)紅染色液染色20-60 s,水洗。用濾紙吸干邊緣水分。
6. 細菌涂片可直接鏡檢觀察。組織切片經(jīng)60℃烤干后,經(jīng)無水乙醇快速脫水三次,分別1 s、3 s、5 s。然后經(jīng)二甲苯透明5 min,最后以中性樹膠封片,鏡檢。
注意事項
1. 試劑使用完后及時擰緊瓶蓋,防止溶劑揮發(fā)。
2. 細菌涂片過厚、結(jié)晶紫染色時間過長、脫色不足等可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果;細菌涂片熱固定過度、脫色過度可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果。建議同時做陰性菌和陽性菌對照組。
3. 操作時請穿實驗服,并佩戴一次性手套。
本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!
合肥萬物生物科技有限公司
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