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產品詳情
操作說明
注意事項
產品簡介
鬼筆環(huán)肽是由鬼筆鵝膏真菌(Amanita phalloides)產生的一種環(huán)肽，可與F肌動蛋白結合，使F肌動蛋白保持穩(wěn)定。TRITC熒光物質標記的鬼筆環(huán)肽可特異的與真核細胞的F-actin結合，從而顯示微絲骨架在細胞中的分布。
本產品為熒光染料TRITC標記的鬼筆環(huán)肽，TRITC發(fā)射波長570-573 nm，可用于細胞或組織的微絲熒光檢測，經染色后細胞骨架呈紅色熒光。本產品使用時推薦的稀釋比為1:300-1:500。按照每張片子需要200 μL染色工作液，本產品可用于70-120張片子的染色。
儲存與運輸
冰袋(wet ice)運輸；-20℃避光保存，有效期12個月。
使用方法
1. 經甲醛固定的細胞爬片或組織切片，PBS洗滌，稍甩干后用組化筆畫圈使組織或細胞位于圓圈中央。
2. 向圓圈內滴加含0.1% Triton X-100的PBS或破膜液完全覆蓋組織，室溫孵育10 min，PBS洗3次，每次5 min。
3. 將本產品用PBS按照1:300-1:500稀釋，配制成鬼筆環(huán)肽染色工作液。向圓圈內滴加鬼筆環(huán)肽染色工作液完全覆蓋組織，室溫避光染色60-120 min，PBS清洗切片3次。
4. (可選做)向組織上滴加DAPI染色試劑染細胞核8-10 min，以PBS清洗切片3次。
5. 切片稍甩干后，滴加抗熒光淬滅封片劑封片，熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察。
注：自備固定液、PBS、破膜液、DAPI染色液、抗熒光淬滅封片劑等。
注意事項
1. 熒光染料都存在淬滅的問題，操作時注意避光。染色工作液現(xiàn)配現(xiàn)用，盡快使用，不可長期保存。
2. 甲醇可以破壞actin蛋白，因此樣本前期固定不能使用含有甲醇的固定液。
3. 鬼筆環(huán)肽通常不具有細胞通透性，極少用于活細胞染色。
4. 操作時請穿實驗服，并佩戴一次性手套。
本產品僅供科研用途，不用于臨床診斷！
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