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產(chǎn)品詳情
操作說明
注意事項
產(chǎn)品簡介
免疫熒光技術利用熒光分子標記的抗體對與之結合的抗原進行定位，實現(xiàn)對蛋白質、聚糖蛋白、小生物分子及非生物分子等進行亞細胞可視化觀察。在此過程中，組織中的自發(fā)熒光往往會嚴重干擾觀察。自發(fā)熒光是在免疫熒光檢測過程中產(chǎn)生的與目的信號無關的背景熒光信號的統(tǒng)稱，其產(chǎn)生的原因主要來自于組織本身的組分，例如黃素、卟啉、植物葉綠素、膠原蛋白、彈性蛋白、紅細胞、脂褐素等都會產(chǎn)生較強的自發(fā)熒光，顯著影響免疫熒光實驗的信噪比。此外組織固定中使用的福爾馬林、多聚甲醛等物質也會產(chǎn)生大量的自發(fā)熒光。
本產(chǎn)品可有效減少組織自發(fā)熒光，提高免疫熒光檢測的信噪比。其中A液有效成分為二價銅離子，可有效減少紅細胞的自發(fā)熒光，B液有效成分為蘇丹黑，能顯著降低脂褐素引起的自發(fā)熒光。
儲存與運輸
常溫避光保存，有效期12個月。
使用方法
1. 免疫標記前的自發(fā)熒光淬滅：組織切片在經(jīng)過抗原修復以后，用組化筆畫圈圈出組織，然后滴加組織自發(fā)熒光淬滅劑A液覆蓋組織室溫孵育30 min，純水洗5 min。
2. 組織切片進行常規(guī)的封閉、一抗孵育、二抗孵育、DAPI復染細胞核等免疫熒光檢測步驟。
3. 免疫標記后的自發(fā)熒光淬滅：滴加組織自發(fā)熒光淬滅劑B液覆蓋組織室溫避光孵育5 min，流水沖洗3 min。
4. 封片：玻片置于PBS中晃動洗滌（可置于脫色搖床上）3次，每次5 min。切片稍甩干后封片，鏡檢。
注意事項
1. 不同樣本其自發(fā)熒光原理不同，使用組織自發(fā)熒光淬滅劑的效果可能會有差異。
2. 理論上講，針對自發(fā)熒光的淬滅劑也會一定程度降低抗體的熒光強度。經(jīng)測試，本試劑對自發(fā)熒光的淬滅程度遠遠超出抗體熒光強度的降低，在二者之間有較好的平衡。
3. 加入組織自發(fā)熒光淬滅劑B液后組織會染成深藍色，但是不會影響熒光拍照。
4. 切片經(jīng)B液孵育完以后可以用水或者PBS洗滌，但不能用含吐溫的溶液洗滌，否則B液被過度洗去影響背景熒光淬滅效果。
5. 組織自發(fā)熒光淬滅劑B液每次用完后務必將瓶蓋擰緊，防止溶劑揮發(fā)。
6. 操作時請穿實驗服，并佩戴一次性手套。
本產(chǎn)品僅供科研用途，不用于臨床診斷！
凡合肥萬物生物科技有限公司銷售的產(chǎn)品均有嚴格的質量保證。如發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品存在包裝規(guī)格疑問，請于收貨之日起七日內(nèi)向我公司總部或當?shù)剞k事處提出，并請保證該產(chǎn)品，以備本公司進行核對檢驗。如果發(fā)現(xiàn)有質量問題，請于收貨后一月內(nèi)保留產(chǎn)品50%以上的量，以便本公司回收產(chǎn)品進行質檢，確認產(chǎn)品質量。如逾期，則視為已經(jīng)對本公司產(chǎn)品進行驗收。 聲明：如發(fā)生產(chǎn)品索賠事宜，本公司僅在產(chǎn)品價格范圍內(nèi)酌情賠償，恕不接受超出產(chǎn)品價格范圍之賠償。客戶在使用過程中有任何技術問題可以撥打技術售后服務電話我們隨時給予解答。
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