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產(chǎn)品簡介
RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液常用于采集動物組織時,僅需室溫操作,即可迅速抑制RNase并穩(wěn)定保存組織樣品中的RNA。本產(chǎn)品使用范圍廣,不僅可廣泛用于新鮮動物組織樣品如肝臟、腦、肺、脾臟、腎臟、心臟、肌肉等,同時也可用于RNA病毒、培養(yǎng)細胞、真菌、細菌、血液以及某些植物樣品的保存,更加適合樣品收集后不能夠立即進行RNA抽提(包括miRNA等小RNA)的情況,特別適用于野外或臨床采集的樣品、大批量采集的動物組織樣品和不能立即凍存樣品的RNA穩(wěn)定與保存。本產(chǎn)品的效果和液氮凍存的效果相當(dāng)。本產(chǎn)品可以迅速滲透到組織內(nèi)部,完全抑制內(nèi)源性RNase活性,避免RNA降解,保持樣本中RNA的完整性,并且和液氮一樣可長期保存樣品中的RNA。本產(chǎn)品安全便捷,無任何毒性和刺激性,可室溫使用,確保了使用時的安全和便捷,與使用液氮相比,可有效避免因使用超低溫的液氮而引起的凍傷、離心管爆裂等安全隱患,并且攜帶、運輸非常方便。在本產(chǎn)品中樣品的保存時間和存儲溫度相關(guān),例如37℃可保存1~2天,室溫25℃可保存一周,4℃可以保存1個月,-20℃或更低溫度可以長期保存。
儲存與運輸
室溫運輸;室溫保存,24個月有效。
組成
Component |
G3019-100ML |
G3019-1.2ML |
RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液 |
100 mL |
70×1.2 mL |
產(chǎn)品說明書 |
1份 |
操作流程
1. 樣品處理
a) 動物組織:將組織剪切成合適大小后(建議組織塊長寬高均不大于0.5 cm),然后迅速完全浸泡于5~10倍體積的RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液中。(注意:已浸入RNAsolid試劑中的組織經(jīng)平衡一段時間后,可從溶液中取出,切成更小的組織塊,再重新放回RNAsolid試劑中;有些比較弱的液體滲透性組織如骨頭等,不適合用本品進行RNA保護。)
b) 植物組織:本品對于柔軟的植物組織(如嫩葉,嫩莖)可直接滲透,且達到理想的RNA保護效果。將組織切成合適的大?。ńㄗh長寬高均不大于0.5 cm)后,然后迅速完全浸泡于5~10倍體積的RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液中。(注意:某些植物組織天生具有的屏障,如葉子表面的蠟層可阻礙RNAsolid試劑的滲透,對于此類組織,通常需破壞這些屏障層以允許溶液的浸透。)
c) 細胞等樣本:收集細胞沉淀(用PBS清洗1-2次),之后迅速小心加入200-300 μL RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液,避免將細胞沉淀沖起,避免細胞重懸。
d) 酵母、細菌等樣本:離心棄上清,收集一定量的菌體沉淀,然后迅速加入200-300 μL RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液完全浸沒菌體沉淀。
e) 全血樣本:收集100-300 μL新鮮的血液樣品,加入含抗凝劑(EDTA鈉鹽、鉀鹽、肝素或檸檬酸鹽等)的抗凝管中,顛倒混勻。按1:5的比例加入試劑,例如200 μL的血液加入1000 μL的RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液,顛倒混勻;對于血清或血漿也可按照1:5比例加入RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液保存。
f) RNA病毒等:對于拭子樣品采集后,將拭子直接加入含有0.5-1 mL的RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液中進行保存;對于液體等樣品采集后加入5-10倍體積的RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液,然后置于相應(yīng)溫度條件下保存。
2. 樣品保存
加入有RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液的樣本可在37℃保存1~2天,2天以后部分組織中的RNA會開始降解。室溫(25℃)穩(wěn)定保存1周,不會有明顯的RNA降解發(fā)生。大部分樣品置于RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液中,4℃條件下可穩(wěn)定保存1個月,不會有明顯的RNA降解發(fā)生。如果需要將樣品長期保存,先使保存在RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液中的樣本于4℃浸透過夜,然后將再樣本直接放入-20℃或-80℃,可長期穩(wěn)定保存3~5年(為了后期加快解凍也可在放入-20℃或-80℃保存前將RNAsolid保護液吸出棄去)。
3. RNA提取
a) 組織樣本:用潔凈鑷子從RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液中取出組織塊,然后用干凈的吸水紙吸掉表面液體。之后立即置于合適的裂解液中勻漿或液氮中進行研磨操作,后續(xù)即可采用Trizol或離心柱法等進行RNA提取操作。
b) 細胞、細菌類樣本:對于細胞、細菌類樣本盡量保持離心后的沉淀處于緊實狀態(tài),避免重懸,否則可能會對后續(xù)RNA得率有一定影響。在保存的樣本中加入與RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液等體積的PBS或DEPC水,5000-10,000g離心1-5分鐘收集沉淀樣品,小心吸除上清液,后續(xù)即可采用Trizol或離心柱法進行RNA提取操作。
c) 全血、病毒類液體樣本:參考后續(xù)使用RNA提取產(chǎn)品說明書進行操作。
注意事項
1. 實驗中獲得的組織樣品適當(dāng)處理大小后,應(yīng)迅速并完全浸泡在RNAsolid組織RNA穩(wěn)定保存液中。
2. 使用本產(chǎn)品在-20℃或-80℃凍存的樣品,反復(fù)凍融3-5次不會顯著影響RNA的質(zhì)量。通常情況下,推薦把本產(chǎn)品保存的樣品在室溫或4℃運輸或短期存放,-20℃或-80℃長期存放。如-20℃或-80℃長期存放,須先4℃存放過夜或更長時間后,才能轉(zhuǎn)移到更低溫度存放。
3. 本產(chǎn)品適用于新鮮動物組織樣品或細胞中RNA的穩(wěn)定與保存。樣品凍存后再用RNAsolid保存的效果會比直接將新鮮樣品用RNAsolid保存差很多。本產(chǎn)品盡管對于凍存的樣品也有一定的穩(wěn)定保存作用,但更適合新鮮樣品。
4. 本產(chǎn)品保存的組織樣品能用常規(guī)的RNA抽提方法進行RNA抽提,如Trizol法和離心柱法等,使用時直接將樣品從RNAsolid試劑中取出當(dāng)作常規(guī)的新鮮或凍存樣品即可,少量殘留的RNAsolid試劑不會影響后續(xù)提取效果。
5. 本產(chǎn)品也可用于組織中蛋白和DNA的保存,但RNAsolid會導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性,后續(xù)可進行Western Blot、SDS-PAGE等實驗,而不適用于蛋白或酶功能活性測試等實驗。樣品從RNAsolid試劑中取出后可直接參考新鮮或凍存樣品并按照常規(guī)方法進行蛋白提取。
6. 用本產(chǎn)品保存后,樣品可能會變得微硬,為正常現(xiàn)象,不會影響后續(xù)RNA抽提時組織的勻漿、裂解等操作。
7. -20℃或-80℃保存情況下,樣品解凍時RNAsolid試劑中可能有結(jié)晶析出,屬正常現(xiàn)象,可待結(jié)晶完全溶解后使用,不會影響后續(xù)RNA的抽提效果。
8. 血液白細胞樣品按照常規(guī)方法分離后,可以參考細胞樣品的方法進行保存。
9. 用于植物樣品保存時,應(yīng)當(dāng)去除表面蠟質(zhì),確保RNAsolid試劑能充分滲透進入組織內(nèi)部。
10. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!
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