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假病毒
來源：萬物生物 發(fā)布時間：2021-11-01
假病毒（pseudovirus)是病毒衣殼蛋白或者包膜蛋白包裹攜帶有報告基因的異源核酸形成的類似于真病毒的具有感染性的病毒顆粒，由于被包裹的核酸不具有復(fù)制形成病毒的全部核酸序列的能力，所以假病毒只有一輪的感染力，操作比較安全。
假病毒主要通過多質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染HEK293T或293FT細胞，在細胞內(nèi)自行復(fù)制、表達組裝形成，通過收集培養(yǎng)基上清或者裂解細胞等方法獲得。
假病毒具備和真病毒一樣的感染性，進入細胞的過程和真病毒一樣，但其進入細胞后不具有復(fù)制產(chǎn)生病毒的能力，因而沒有危害，可以更安全地用于中和抗體和抗病毒藥物檢測。對傳染性強、致病性強的病毒，如SARS-CoV，Ebola病毒，狂犬病毒，H7N9等的研宄具有極大的危險性，而且數(shù)量有限，而假病毒安全性好，并可以通過轉(zhuǎn)染技術(shù)大量制備，為這些危險性高的病毒研宄提供了方便。
假病毒體系有多種，主要包括以慢病毒載體構(gòu)建的假病毒，以病毒蛋白自組裝形成的假病毒，以及以病毒基因改造、插入報告基因所形成的假病毒。慢病毒載體是以HIV-1 為基礎(chǔ)發(fā)展起來的，包含了包裝、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息，可提供所有轉(zhuǎn)錄并包 裝RNA到重組假病毒所需要的全部輔助蛋白，利用表達載體和包裝質(zhì)粒同時共轉(zhuǎn)染細胞， 在細胞中進行病毒包裝，包裝好的病毒顆粒分泌到細胞外培養(yǎng)基中。
假病毒體系的特點是克服了傳統(tǒng)方法的缺陷，使檢測技術(shù)更安全、簡便、快速、高通量，而且使一些本身很難培養(yǎng)的病毒也能采用培養(yǎng)的方法進行檢測。
假病毒標準品要求：
1. 假病毒標準品具有和待檢測目的病毒同樣或者類似的理化性質(zhì)，如均為包裹了核酸物質(zhì)的蛋白顆粒。
2. 假病毒標準品攜帶了與待檢測目的病毒相同的探針核酸片段。
3. 假病毒標準品純度足夠高，生產(chǎn)時需去除外源污染性核酸物質(zhì)。
假病毒與核酸檢測試劑盒：
假病毒在檢測領(lǐng)域的應(yīng)用主要為病毒核酸檢測試劑盒中作為陽性對照標準品和內(nèi)控標準品。最新的CFDA申報指導(dǎo)原則中，要求病毒核酸檢測試劑盒用假病毒作為陽性標準品和內(nèi)控標準品。